Onderzoek van aminozuren
1.Onderzoeksvraag
Hoe kun je bepaalde aminozuren aantonen?
2.Voorbereiding
Materialen
- 4 proefbuizen en proefbuishouder
- Lepel
- Pipet 10 ml
- Bunsenbrander
- Glycine
- Arginine
- Tryptofaan
- 10% natriumhydroxide oplossing
- Kopercarbonaat
- Sakaguchi reagens I en II: 1% 1-naftol in alcohol met een paar druppels 10% natriumhypobromietoplossing van broomwater.
- Sakaguchi reagens II: 40% NaOH
- Hopkins-Cole reagens : Voeg aan 10 g magnesiumpoeder voldoende water toe om het onder te dompelen. Voeg vervolgens langzaam 250 ml koude verzadigde oxaalzuuroplossing toe. Filter magnesiumoxalaat gevormd. Zuur het filtraat aan met 25 ml ijsazijn en verdun het tot 1 L met water.
- Geconcentreerd zwavelzuur
- Gedestilleerd water
3. Werkwijze
Onderzoek glycine
Breng een spatelpunt glycine in 3 ml water en verhit. Voeg hierbij een spatelpunt kopercarbonaat. Voeg vervolgens wat natriumhydroxide toe.
Sakaguchi test
Neem een spatelpunt arginine en voeg hierbij 4 ml water. Voeg hierbij 0,5 ml Sakaguchi reagens 1 en meng. Voeg hierna 2 ml Sakaguchi reagens 2 toe.
Hopkins Cole test
Breng een spatelpunt tryptofaan in 3 ml water en meng met 2 ml Hopkins-Cole reagens. Voeg hieraan 1 ml gec zwavelzuur.
4. Waarneming
Glycinetest
Er ontstaat een donkerblauwe oplossing. Na toevoeging van natriumhydroxide ontstaat geen neerslag maar stabiel kopercomplexverbinding.
Sakaguchitest
Specifiek voor arginine waarbij een rode kleur ontstaat
Hopkins-Cole test
Specifiek voor tryptofaan met vorming van een paars-roodbruine ring