Microscopie bloed

1.Onderzoeksvraag

Welk bloedbeeld bevat het gevonden bloed van het slachtoffer onder de microscoop?

2.Voorbereiding

a. Begrippen

May- Grünwald is op basis van alcohol en bevat May – Grünwalds eosine, methyleenblauw en methanol ( > 85% ).

Giemsa is op basis van alcohol en bevat Giemsas azuurblauwe eosine, methyleenblauw, methanol ( > 50% ) en glycerol.

b. Materialen

• – microscoop
• – dekglaasje
• – centrifuge
• –  objectglaasje
• – May-Grunwald kleuring
• – Giemsa kleuring
• – methanol
• – KH₂PO₄
• – Na₂HPO₄

Fosfaatbuffer met een pH van 6,6: weeg 1,639 g KH₂PO₄ (MM: 136,09 g/mol) af en 0,793 g Na₂HPO₄ (MM: 268,1g/mol), los dit op in een maatkolf van 100 ml.

c. Opstelling

d. Veiligheid

3. Uitvoeren

a. Werkwijze

1. Centrifugeer het bloedstaal 1 minuut op 5000 toeren per minuut.
2. Je kan nu een onderscheid maken tussen de verschillende componenten in het bloed.
3. Neem een objectglaasje en maak een uitstrijkje van 1 druppel bloed.
4. Instructies uitstrijkje: doe een druppel bloed op 1,5 cm van het objectglaasje. Met je duim en wijsvinger van de ene hand zorg je ervoor dat je het objectglaasje stevig op de tafel houdt en met de andere hand ga je een 40°-hoek maken met een ander objectglaasje. Vervolgens ga je met het objectglaasje dat in 40° staat achteruit trekken over de druppel zodat het bloed uitloopt een verdeelt is over de volledige lijn van het objectglaasje. Dan ga je met het objectglaasje (40°) een snelle beweging maken en naar voor schuiven met dezelfde druk en hoek. Het bloed zal zich meeslepen en gaat steeds dunner worden naar achter toe. Vervolgens laat je het uitstrijkje aan de lucht drogen.
5. Kleur het uitstrijkje volgens de instructies in onderstaande tabel
6. 
7. – Na de kleuring bevestig je een dekglaasje en een druppel olie. Zet het onder de microscoop en zoek naar de rode bloedcellen, bloedplaatjes en de  verschillende soorten witte bloedcellen.

b. Waarneming

4.Reflecteren

a. Besluit

Het verschil tussen T- en B-lymfocyt is niet zichtbaar onder de microscoop.

Deze uitstrijkjes kunnen voor een lange tijd worden gebruikt.

Indien er op een school geen microscopen aanwezig zijn om de uitstrijkjes te bestuderen, kan je via videomateriaal op Youtube of afbeeldingen uit de literatuur, zoals in het boek van Barbara Bain. Hiermee kan je duidelijk de verschillende soorten bloedcellen aantonen.

5.Tips en Trics