Kleurstoffen in groene noedels aantonen
1.Onderzoeksvraag
Hoe kunnen we kleurstoffen uit groene noedels aantonen?
2.Voorbereiding
Materialen
- Aceton (F, Xi), zeezand
- Petroleumbenzine 100-140°C
- Kaliumwaterstofcarbonaat
- Loopvloeistof voor chromatografie: benzine 100-1400C – propaan-2-ol – water100:10:0.5
- Kiezelgel- folie (Polygram)
- Groene bladeren, e.B. Spinazie
- zeezand
- Mortier en stamper
- Trechter, filterpapier
- 10 ml maatcilinder
- Huishoudhanddoeken
- Micropipetten
- Scheidingskamer,föhn
3. Werkwijze
- Plet ongeveer 15 g groene pasta zo fijn mogelijk. De meest geschikte is een elektrische koffiemolen- hoe fijner het ‘pastapoeder’ wordt, hoe meer kleurstof kan worden. Voeg 10 ml benzine (100 – 140 o c) toe en laat ongeveer 5 minuten staan onder af en toe roeren.
- Filtreer in een reagens – of klik op dekselglas. Als de oplossing erg zwak gekleurd is, moet deze voorzichtig worden opgeconcentreerd.
- Het kan dan direct worden gebruikt voor chromatografie.
Voer nu de chromatografie uit zoals beschreven in de regulering van het experiment “Kleurstoffen in groene bladeren
- Plet de bladeren met je vingers zo fijn mogelijk en doe ze vervolgens in een vijzel.
- Voeg 3 spatelpunten zeezand,1 spatelpunt kaliumbicarbonaat en 3 – 5 ml aceton toe en homogeniseer het plantmateriaal met de stamper .
- Plaats een filterpapier in een trechter, bevochtig het met aceton, bevestig de trechter in een statief en plaats er een beker onder.
- Voer de gemalen bladeren rechtstreeks in de trechter. Giet indien nodig wat aceton na. Probeer een zo geconcentreerd mogelijke oplossing te verkrijgen , diepgroen van kleur. Als de kleurstofoplossing niet volledig helder is, moet deze opnieuw worden gefilterd.
- Dompel een micropipet onder in de kleurstofoplossing : de oplossing stijgt vanzelf 1 – 2 cm naar boven. Veeg eventuele druppels met een papieren doek weg.
- Breng de kleurstofoplossing nu bandvormig aan, ongeveer 1,5 cm boven de onderrand op de silicagel DC-folie.
- Droog de aangebrachte band met de föhn.
- Doe 10 ml loopvloeistof in de scheidingskamer, sluit en schud kort zodat stoomverzadiging ingaat.
- Plaats nu de DC folie in de scheidingskamer.
- Na 12 – 14 min is de scheiding klaar. Haal de folie eruit en droog deze met de föhn.