Isoleren van DNA van een banaan
- Onderzoeksvraag
Hoe kunnen we DNA uit een banaan afzonderen?
- Voorbereiding
Begrippen als achtergrond voor experiment
Extractie = een scheidingstechniek die gebaseerd is op het verschil in oplosbaarheid
DNA = desoxyribonucleïnezuur = een molecule met een complexe structuur die de genetische informatie van elk levend organisme op aarde van generatie op generatie opslaat en doorgeeft.
Materiaal + stoffen
- Kookplaat
- 3 x bekerglas 150 ml
- Warmtebestendige handschoen
- 100 ml water
- Lepel
- Zout
- Dreft
- Maatcilinder 10 ml
- Ethanol (99,8%)
- Roerstaaf
- Ijsblokjes
- Banaan
- Proefbuis
- Pipet
Bereiding oplossingen
Ethanol 70%: Doe in de maatcilinder van 10 ml, 7 ml geconcentreerd ethanol. Leng aan met water tot 10 ml en roer met een roerstaaf. Zet de maatcilinder in een bekerglas met ijsblokjes.
Opstelling (foto)
- Uitvoeren
Werkwijze
- Verwarm 10 ml water op een kookplaat zodat deze warm is
- Doe 7 ml ethanol 99,8% in de maatcilinder van 10 ml en leng aan tot 10 ml. Roer met een roerstaaf. Zet de maatcilinder in een bekerglas met ijsblokjes
- Plet 3 cm banaan en doe het in een proefbuis
- Voeg aan het verwarmde water een halve theelepel zout en 3 druppels Dreft toe. Roer
- Doe 4 ml van het zoute afwaswater bij de banaan in de proefbuis. Schud
- Breng nadien 4 ml van het gekoelde ethanol aan in de proefbuis. NIET schudden. Laat rusten en kijk wat er gebeurt
Waarneming (+ foto’s)
Er ontstaan witte slierten in het ethanol.
Via een pincet ofwel door decanteren kan je de slierten uit het staal nemen.
- Reflecteren
Besluit
De DNA-extractie bestaat uit 3 stappen
Stap 1: Lyse = het uiteenvallen van het celmembraan
Het detergent, dat natriumdodecylsulfaat bevat, zorgt voor het vernietigen van de kernen en celmembranen (= lyse). De oorzaak van het vernietigen is de oppervlakte-actieve stof in het detergent. Deze stap is belangrijk omdat het DNA vrijkomt.
Stap 2: DNA afzonderen
De Na-ionen van NaCl (zout) binden aan de fosfaatgroepen van de DNA-molecule. Hierdoor wordt het DNA neutraler en dus ook meer apolair.
Stap 3: oplossen in ethanol
Het DNA, dat neutraler is, lost op in het ethanol. Apolaire molecule lossen beter op in apolaire oplossingen. Het toevoegen van koude ethylalcohol vermindert de resulterende oplosbaarheid van DNA en natriumverbindingen in water.
Bronnen
- Tips and tricks
Je kan deze proef ook uitvoeren met een kiwi. Het voordeel van het gebruik van een kiwi, in tegenstelling tot een banaan, is de opkuis. De kiwi is makkelijker te verwijderen uit de proefbuis.
Je kan deze methode gebruiken om het DNA te isoleren van aardbeien , perziken en tomaten.
Een UCLL project
Partners
