Isoleren en identificeren van kleurstoffen in zetmeelrijke voedingsmiddelen   (rode vruchtengelei of puddingpoeder)

1.Onderzoeksvraag

Hoe kunnen we kleurstoffen uit zetmeelhoudende voedingsmiddelen isoleren en identificeren?

2.Voorbereiding

Materialen

• 10 g van voedsel
• Ammoniak in alcoholoplossing: 28 ml alcohol – 10 ml water – 2 ml ammoniak 5%
• Wijnsteenzuur
• 5% ammoniakoplossing
• Ontvette woldraad
• Loopvloeistof: natriumcitraat (2,5%) – ammoniakoplossing (5%) -methanol: verhouding 20:5:3
• Testkleurstofmengsel
• Testkleurstoffen
• Balans
• Föhn
• Pincet
• Smeltkroestang
• Rubberen handschoenen
• Glazen trechter
• Filtreerpapier
• Bunsenbrander
• Statief, draadnet
• 250 ml maatbeker
• 50 ml maatcilinder
• pH papier
• glazen schaaltje
• micropipetten
• kooksteentje
• cellulose DC-folie (polygram)
• ontwikkelkamer
• proefbuis

3. Werkwijze

Isolatie van kleurstoffen:

1. Weeg afhankelijk van de intensiteit van het kleuren 5 – 10 g voedsel   en doe het in een bekerglasvan 250 ml .
2. Voeg 40 ml ammoniakalcoholoplossing   toe en laat ongeveer 10 minuten staan. Roer af en toe.
3. Filtreer in een ander  bekerglas van 250 ml . Als een dikke,  moeilijk te filteren pap is gevormd, is het aangewezen   om een waterstraalpomp te gebruiken .
4. Voeg 25 ml water en een spateltip toe van wijnsteenzuur.   Controleer met pH-papier of de oplossing  zuur is.   Anders moet er nog meer wijnsteenzuur worden toegevoegd.
5. Voeg een ontvet wollen draad en  kokende stenen toe . Verwarm  tot op het einde van een groot deel van de kleurstoffen op   de wollendraad wordt aangebracht.
6. Haal  de woldraad eruit en spoel deze meerdere keren grondig  af onder stromend water.
7. Voeg nu de grondig gereinigde woldraad  toe aan een bekerglas van 250 ml en voeg 30 ml 5 %  ammoniakoplossing toe.
8. Verhit.   Roer tot de   kleurstof  bijna volledig in oplossing is gegaan.
9. Haal de bijna verkleurde woldraad eruit met een pincet  en verdamp tot ongeveer 3 ml.   Giet in een kleine reageerbuis en concentreer tot 1 ml .

   Breng het staal aan op de DC-folie:

10. 

    1 Kleurstof van voedingsmiddel

    2Testkleurstofmengsel3

    3 E104 geel

     

    Droog de kleurpunten met een föhn.

    Doe 10 ml loopvloeistof in de scheidingskamer, sluit het en schud krachtig om stoomverzadiging te bereiken.

    Plaats de DC folie in de scheidingskamer.

    Haal  het chromatogram eruit na ongeveer 20 minuten  ontwikkeltijd en droog het met de föhn.

    Vergelijk met de kleurstoffen van het testkleurstofmengsel  welke  kleurstoffen  er in het levensmiddel zou  kunnen zijn.