Isoleren en identificeren van kleurstoffen in suikerrijk voedsel (gummyberen, geleisiroop, instantdrankjes)
1.Onderzoeksvraag
Hoe kunnen we kleurstoffen uit suikerrijke voedingsmiddelen isoleren en identificeren?
2.Voorbereiding
Materialen
- 10 g van voedsel
- Wijnsteenzuur
- 5% ammoniakoplossing
- Ontvette woldraad
- Loopvloeistof: natriumcitraat (2,5%) – ammoniakoplossing (5%) -methanol: verhouding 20:5:3
- Testkleurstofmengsel
- Testkleurstoffen
- Balans
- Föhn
- Pincet
- Smeltkroestang
- Rubberen handschoenen
- Glazen trechter
- Filtreerpapier
- Bunsenbrander
- Statief, draadnet
- 250 ml maatbeker
- 50 ml maatcilinder
- pH papier
- glazen schaaltje
- micropipetten
- kooksteentje
- cellulose DC-folie (polygram)
- ontwikkelkamer
- proefbuis
3. Werkwijze
Isolatie van kleurstoffen:
- Afhankelijk van de intensiteit van de kleur, doe 5 – 10 g voedsel in een bekerglas van 250 ml .
- Voeg ongeveer 50 ml water en een spatelpunt van wijnsteenzuur toe. Test met pH-papier op het zure karakter van de oplossing. Plaats de beker op een statief met draadnet en verwarm met de bunsenbrander. Roer regelmatig tot het voedsel volledig is opgelost. Bij gebruik van siroop of instant poeder, deze stap overslaan. .
- Voeg kooksteentjes en een ontvettende woldraad toe . Roer tijdens verhitten totdat bijna alle kleurstof over gaat op de wollen draad.
- Haal de woldraad eruit met een pincet en spoel deze meerdere keren af onder stromend water om het te ontdoen van suikerresten.
- Plaats nu de grondig gezuiverde woldraad in een bekerglas van 250 ml en voeg 30 ml 5 % ammoniakoplossing toe. Verhit en roer tot de kleurstof bijna volledig in oplossing is gegaan.
- Haal de bijna verkleurde woldraad eruit met een pincet en concentreer de kleurstof eerst tot ongeveer 3 ml. Giet vervolgens in een kleine reageerbuis en concentreer verder tot 1 ml.
- Breng het staal aan op de DC-folie:
- 1 Kleurstof van voedingsmiddel – 2Testkleurstofmengsel -3 E104 geel
Droog de kleurpunten met een föhn.
Doe 10 ml loopvloeistof in de scheidingskamer, sluit het en schud krachtig om stoomverzadiging te bereiken.
Plaats de DC folie in de scheidingskamer.
Haal het chromatogram eruit na ongeveer 20 minuten ontwikkeltijd en droog het met de föhn.
Vergelijk met de kleurstoffen van het testkleurstofmengsel welke kleurstoffen er in het levensmiddel zou kunnen zijn.