Factoren die een invloed hebben op de enzymatische activiteit

1.Onderzoeksvraag

Welke factoren beïnvloeden de werking van enzymen?

2.Voorbereiding

Materialen

• 10 proefbuizen en proefbuishouder
• Bunsenbrander
• Magneetroerder
• Verhittingsbad
• Lepel
• Pipet 10 ml
• Thermometer
• Eiwitsuspensie
• Trypsine
• Verse melk
• Lipase
• Fft oplossing
• Natriumcarbonaatoplossing 10%
• Amylase
• Zetmeeloplossing
• Lugoloplossing
• Ureum
• Urease
• Gedestilleerd water
• Geconcentreerd zoutzuur
• 7% kopersulfaatoplossing

3. Werkwijze

Invloed van temperatuur

1 proefbuis vullen met 5 ml gedestilleerd water. 1 spatelpunt ureum, 5 druppels fft-oplossing en 1 spatelpunt urease toevoegen. Voorzichtig mengen en verhitten tot kookpunt.

10 ml zetmeeloplossing brengen samen met 1 spatelpunt amylase en verhitten. Na afkoelen behandelen met een aantal druppels lugoloplossing.

1 proefbuis voor de helft vullen met verse melk en enkele druppels fft oplossing. Voorzichtig natriumcarbonaatoplossing toevoegen tot een rode kleur. 1 spatelpunt lipase toevoegen en boven een bunsenbrander houden tot koken.

In een proefbuis 6 ml gedestilleerd water brengen en 1 spatelpunt trypsine, 4 druppels natriumcarbonaatoplossing en 3 ml eiwitsuspensie. Vervolgens tot koken verhitten

 

Proefbuizen zoals boven vullen en hieraan 3 druppels 7% kopersulfaatoplossing toevoegen en verwarmen gedurende 10 minuten? Aan de zetmeeloplossing enkele druppels lugol toevoegen.

 

pH afhankelijkheid

10 ml zetmeeloplossing met een spatelpunt amylase mengen en hieraan 3 druppels geconcentreerd zoutzuur toevoegen.

In een andere proefbuis 6 ml gedestilleerd water brengen met 1 spatelpunt trypsine, 2 druppels geconcentreerd zoutzuur en 3 ml eiwitsuspensie. Verhit de stalen bij 37°C gedurende 10 minuten. Voeg aan het zetmeelstaal enkele druppels lugoloplossing toe.

 

4. Waarneming

Bijna alle enzymen zijn temperatuurafhankelijk. Bij een hoge temperatuur denatureren de enzymen en zijn onwerkzaam. De optimale temperatuur ligt meestal bij 37°C.

Het incuberen met zware metalen is bekend bij eiwitten, dus ook bij enzymen.

 

Enzymen zijn pH afhankelijk. Dit is aan te tonen door de inactiviteit door geconcentreerd zoutzuur.