Dunne laagchromatografie van suikersurfactanten

1.Onderzoeksvraag

Hoe kun je  suikerhoudende oppervlakte-actieve stoffen  aantonen?

2.Voorbereiding

Materialen

• Scheidingskamer voor dunnelaagchromatografie
• reageerbuizen
• Bekers (50 ml,100 ml)
• Erlenmeyer kolf (200 ml)
• Meetcilinder ( 10 ml, 100 ml)
• Meetpipet ( 1mL, 10 ml)
• capillair 1 en 5 µl
• DC geprefabriceerde platen silicagel
• Sproeier of dompelkamer
• haardroger
• Alkyl polyglucoside (APG)
• Ethanol (F, licht ontvlambaar)
• Butanon
• Thymol
• conc.   Zwavelzuur (w = 96 – 98 %)
• afwasmiddel, wasmiddel, detergenten
• gedestilleerd water

3. Werkwijze

1. Vervaardiging van de vergelijkingsoplossing:

100 mg alkyl polyglucoside,APG wordt opgelost in 10 ml   ethanol.

2. Vervaardiging van monsteroplossingen:

 Poedermonsters:   2 g poedervormige wasmiddel wordt gemengd in een kleine Erlenmeyer-kolf met 20 ml  ethanol en enkele minuten verwarmd  in een waterbad  bij ongeveer 60 ° C.

Vloeibare monsters: 1 ml  vloeibaar wasmiddel of hand afwasmiddel, in het geval van viskeuze monsters 1 g, worden   gemengd met 20 ml  ethanol en   intensief.

 

3. Vervaardiging van het stromingsmiddel (butanaan,   met water verzadigd):  

50 ml butanon wordt gemengd  in een Erlenmeyerkolf (200 ml) met enkele  milliliter  gedestilleerd water  . Voor fasescheiding, laat een paar   minuten.  De bovenste fase  wordt afgegoten  en gebruikt  voor chromatografie.

4. Bereiding van de detectiereagensoplossing (thymol-reagens):

 

0,5 g thymol wordt opgelost in 100 ml ethanol en zorgvuldig met 5 ml zwavelzuur (w = 96 – 98 %ig) gevoegd. Het reagens heeft een houdbaarheid van twee dagen.

5. Uitvoeren van de dunnelaagchromatografische scheiding:

Met behulp van een capilliar,  1 µL van de oppervlakte-actieve vergelijkingsoplossingen en   5 ul van de  monsteroplossingen worden  op de DC-plaat gebracht.

De ontwikkelingskamer is  1 cm hoog .  De voorbereide silicagelplaat wordt zorgvuldig in de scheidingskamer geplaatst.   Het wordt ontwikkeld totdat een  loophoogte van 7 tot 8 cm is bereikt.  De looptijd is ongeveer 20 minuten.

6. Detectie:

De plaat wordt uit de  ontwikkelingskamer gehaald en r gedroogd met een  föhn.  Om  de vlekken te visualiseren, wordt de gedroogde plaat in de trekker gespoten met  thymol-reagens  en vervolgens gedurende 10 minuten in de droogkast. verwarmd tot 110 °C.

 

4. Reflectie

1. Thymol is een specifiek reagens voor koolhydraten. Alleen op suiker gebaseerde oppervlakte-actieve stoffen verschijnen als rode vlekken. Alle andere oppervlakte-actieve stoffen  geven geen kleur.
2. Bij een scheiding op silicagellagen worden de alkylpolyglucosiden gescheiden door het aantal    Naast een  hoofdvlek (monoglucoside) verschijnt een zwakkere secundaire vlek (diglucoside). Hogere gepolymeriseerde glucosides  verschijnen niet als gevolg van  te lage concentraties.
3. Dit experiment maakt geen gebruik van zeer vervuilende   chemicaliën.  Als het bewijsreagens  door de leraar wordt voorgemengd, hebben  de  studenten geen contact met corrosieve oplossingen.
4. Een DC-onderzoek van suikersurfactanten is mogelijk met zeer goede resultaten, zelfs op niet-polaire DC-platen,