DNA uit kiwi

1.Onderzoeksvraag

Hoe kunnen we met huishoudproducten DNA uit de cellen van een kiwi halen?

2.Voorbereiding

a.Begrippen als achtergrond voor experiment

• Celwand
• Kernmembraan
• DNA

b.Materiaal + stoffen

• 8 à 9 kiwi’s
• Weegschaal
• NaCl
• Afwasmiddel
• Gedestilleerd water
• 2 bekerglazen 250ml
• Mes en snijplank
• Warmwaterbad 60°C
• Timer
• Ijs in een grote beker
• Roerstaafje
• Koffiefilters
• Trechter
• Zuigpeer
• Pipet 10ml
• Proefbuizen
• Proefbuisrek
• 100ml ijskoude ethanol

c.Opstelling (foto)

d.Etiketten

e.COS brochure

3.Uitvoeren

a.Werkwijze

1. Meng 3 gram zout met 10 ml afwasmiddel. Vul aan met water tot 100
2. Snij de (gepelde) kiwi klein in stukjes van ruwweg 5 mm². Doe de stukjes beker en giet er het afwasmiddel zoutmengsel op.
3. Meng het geheel door draaibewegingen met de beker te maken. Plaats gedurende 15 minuten op 60°C (in een waterbad).
4. Laat dit mengsel een beetje afkoelen.
5. Plaats de koffiefilter in de trechter. Giet het mengsel erdoor en vang tweede beker (= filtraat).
6. Pas goed op dat het schuim op het oppervlak filtraat niet verontreinigt. Dit filtraat is het kiwi-extract dat oplosbare DNA bevat.

ISOLATIE VAN DNA UIT HET KIWI-EXTRACT

1. Breng 6 ml van het kiwi-extract in een reageerbuis.
2. Giet heel voorzichtig een 9ml ijskoude alcohol bovenop het extractmengsel de alcohol langzaam in de schuin gehouden buis).
3. Laat dit geheel 2 staan zonder aan te raken.
4. Draai zachtjes met het glasstaafje op het scheidingsvlak. Let er goed verschillende lagen niet al te zeer verstoort, want zo zou het fragiele breken. Er is een wit web van slijmerig DNA (lijkt op snot) te zien.

b.Waarneming (+ foto’s)

Tussen de ethanol en de oplossing ontstaat er een dunne troebele neerslag.Als je hier met een roerstaafje in roert, lijkt de neerslag op slijm.

4.Reflecteren

Eerst maak je het weefsel en dus ook de cellen mechanisch stuk. Daarna breek je de membranen die rond de cel en rond de celkern zitten, af met behulp van een
zeepoplossing. Zo kan het DNA uit de celkern vrijkomen.
In die zeepoplossing zit ook zout. Dit zout is onder andere nodig om de vrijgekomen eiwitten te “complexeren”. Zo kan je het DNA gemakkelijk van de eiwitten scheiden. De celfragmenten verwijder je door filtratie; het DNA blijft dan achter. Met ijskoude alcohol doe je het DNA neerslaan.

5. Aanvullingen

Zorg dat de ethanol zeer koud is. Je kan het filtraat beter ook koelen.