Detectie van proteasewerking  met gelatine

1.Onderzoeksvraag

Hoe kun je proteasewerking in wasmiddelen aantonen?

2.Voorbereiding

Materialen

• Bekerglas (250 ml)
• Bekers (50 ml)
• gelatine
• Protease
• Wasmiddel (met enzymen)
• Wasmiddel (enzymvrij, vb. Wolwasmiddel)

3. Werkwijze

Door 4 g gelatine op te lossen in 100 ml heet water, wordt  een ongeveer 4%  gelatineoplossing bereid.

In elk geval worden ongeveer 500 mg van de wasmiddelmonsters  en 100 mg protease opgelost in elk bekerglas (50 ml) in10 ml gedestilleerd water of ermee gemengd. Ter vergelijking, alleen water wordt gevuld in een van de bekers.

Het wordt nu toegevoegd aan 20 ml van de nog warme gelatineoplossing, meng en zet zo koel  mogelijk (koelkast)   zodat de gelatine kan   stollen.

 4. Waarneming

Alleen in enzymvrije oplossingen kan de gelatine vast worden.  Indien proteasen aanwezig zijn, wordt de gelatine gedeeltelijk gehydrolyseerd en blijft viskeuze  vloeistof over.

Gelatine lost op in heet water en vormt  bij afkoeling  een aaneengesloten,     stabiele gel met een relatief stevige structuur. Onder  invloed van proteasen worden de eiwitketens  gesplitst en   kan  de gelstructuur zich niet vormen en blijft de gelatine vloeibaar. Zonder proteasen blijft  de gelatine onveranderd.  Enzymen fungeren als specifieke biokatalysen. Proteasen zijn in staat om eiwitverbindingen     (eiwitten)   te  splitsen en af te breken in kleinere in water oplosbare fragmenten  (aminozuren,peptiden), die vervolgens gemakkelijk  uit het weefsel kunnen worden  gewassen.