Identificatie van kleurstoffen op basis van hun absorptiespectra
1.Onderzoeksvraag
Hoe kunnen we kleurstoffen identificeren op basis van absorptiespectra?
2.Voorbereiding
Materialen
- Spectrofotometer met continu spectrum,2 cuvetten
- spatel, 2 bekers (100 ml), trechter,filterpapier
- Oplosmiddelen van kleurstoffen:
- Water bij levensmiddelen of vacuolekleurstoffen
- Aceton (F, Xi)voor groen en geel bladkleur
- Ontwikkelde, gedroogde chromatogrammen met bandvormige toepassing uit de vorige experimenten.
3. Werkwijze
- Schraap met de spatel de kleurstofbanden van de gewenste kleurstoffen van verschillende DC-films af en verzamel de gekleurde Cellulose of de silicagel in een bekerglas.
- Voeg 5 ml oplosmiddel toe: water voor voedselkleurstoffen of vacuolekleurstoffen, ,aceton in groene en gele bladkleurstoffen van chloroplasten.
- Roer met een glazen staaf tot de kleurstof is opgelost.
- Filter in een ander De duidelijke oplossing kan nu gebracht worden in een cuvet. De vergelijking cuvet wordt gevuld met het oplosmiddel.
- Steek de cuvet in de fotometer en vergelijk .
- Meet de absorptie van licht als functie van de golflengte in het bereik van 400 – 680 nm.
- Maak een tabel met waarden en teken het absorptiespectrum op millimeterpapier. Bepaal het absorptiemaximum van de kleurstof en vergelijk met de waarden uit de kleurstoftabel .
Voorbeeld: Absorptiespectrum van Ponceau 4 R (E 124)