Isoleren en identificeren van kleurstoffen in gelatinehoudend voedsel (taartversiering, geleisiroop)

1.Onderzoeksvraag

Hoe kunnen we kleurstoffen uit gelatinehoudende voedingsmiddelen isoleren en identificeren?

2.Voorbereiding

Materialen

• 10 g van voedsel
• Wijnsteenzuur
• 50 ml 50% brandalcohol
• 5% ammoniakoplossing
• Ontvette wollen draad
• Loopvloeistof: natriumcitraat (2,5%) – ammoniakoplossing (5%) -methanol: verhouding 20:5:3
• Testkleurstofmengsel
• Testkleurstoffen
• Balans
• Föhn
• Pincet
• Smeltkroestang
• Rubberen handschoenen
• Glazen trechter
• Filtreerpapier
• Bunsenbrander
• Statief, draadnet
• 250 ml maatbeker
• 50 ml maatcilinder
• glazen schaaltje
• micropipetten
• kooksteentje
• cellulose DC-folie (polygram)
• ontwikkelkamer
• proefbuis
•  

3. Werkwijze

Isolatie van kleurstoffen:

1.   Afhankelijk van  de intensiteit van de kleur, doe 5 – 10 g voedsel  in een bekerglas van 250 ml. Voeg 50 ml 50% brandalcohol toe en laat 5 min wachten.
2. Filtreer in een ander  bekerglas van 250 ml . Als een dikke,  moeilijk te filteren pap is gevormd, is het aangewezen   om een waterstraalpomp te gebruiken .
3. Draag tijdens dit testonderdeel een bril ,alcoholdampen zijn ontvlambaar.    Doe het filtraat in een grote porseleinen kom en verdamp de alcohol (Bunsenbrander, statief, net)tot  een volume van ongeveer 5 ml.
4. Voeg 25 ml water en een spateltip toe aan wijnsteenzuur.   Test met pH-papier op zuur karakter van de oplossing.
5. Voeg een ontvet wollen draad en  kooksteentjes. Verwarm  en roer tot een groot deel van de kleurstoffen op de wollen draad is aangebracht. Haal  de wollen draad eruit en spoel deze meerdere keren grondig  af onder stromend water.
6. Plaats nu de grondig gereinigde wollen draad  in een bekerglas van 250 ml en voeg  30 ml 5 % ammoniakoplossing toe.
7. Verhit tot koken. Roer tot de kleurstof  bijna  volledig  in oplossing is gegaan.
8. Haal  de bijna verkleurde wollen draad eruit met  een pincet en concentreer de  kleurstofoplossing eerst tot ongeveer 3 ml.  Giet dan  rond in een kleine reageerbuis en concentreer verder  tot I ml.  Laat de oplossing koelen en giet op een horlogeglas
9. Breng het staal aan op de DC-folie:
10. 1 Kleurstof van voedingsmiddel   –  2Testkleurstofmengsel – 3 E104 geel

    Droog de kleurpunten met een föhn.

    Doe 10 ml loopvloeistof in de scheidingskamer, sluit het en schud krachtig om stoomverzadiging te bereiken.

    Plaats de DC folie in de scheidingskamer.

    Haal  het chromatogram eruit na ongeveer 20 minuten  ontwikkeltijd en droog het met de föhn.

    Vergelijk met de kleurstoffen van het testkleurstofmengsel  welke  kleurstoffen  er in het levensmiddel zou  kunnen zijn.