TLC van citroensap

1.Onderzoeksvraag

Is citroensap een zuivere stof? Kunnen we citroensap opsplitsen in haar verschillende componenten en bepalen of het gaat om zuren of basen?

2.Voorbereiding

Materiaal + stoffen

• Capillairen
• Sproeifles
• Klein bekerglas
• Citroensap,
• Citroenzuur,
• Vitamine C,
• wijnsteenzuur,
• Broomthymolblauwoplossing,
• loopvloeistof (n-butanol/azijnzuur/water: 75/15/10) en geconc ammoniak.

Opstelling (foto)

Etiketten

3.Uitvoeren

a.Werkwijze

1. Breng met een kapillair staaltjes citroensap, citroenzuur, vitamine C en andere zuren op de TC-plaat en dit op 1 cm van een kant.
2. Droog de stalen en breng dit in een ruimte met de loopvloeistof zodat de stalen niet in de loopvloeistof staan.
3. Laat de chromatogram lopen tot 2 cm onder de bovenkant.
4. Droog gedurende 30 min bij 60% in een broedstoof en besproei met de broomthymolblauwoplossing.
5. Breng de chromatogram in een kamer met een beetje ammoniak in een beker en laat de chromatogram hierbij staan tot het plaatje net van kleur is veranderd. Doe de waarneming.

b.Waarneming (+ foto’s)

Zodra we de TLC-plaat in de kamer met ammoniak brengen kleurt de hele plaat blauw, behalve de zuren, het citroensap en het ascorbinezuur (vitamine C). Deze stoffen geven het chromatografie spectrum. Ze zijn uiteengevallen in hun scheidbare componenten

4.Reflecteren

De geteste stoffen zijn te scheiden in hun afzonderlijke componenten door middel van een TLC (Thin Layer Chromatografie). We zien duidelijk de verschillende kleuren voor de basische en de zure componenten nadat de zuren zijn gescheiden.

Opmerkingen.

De TLC plaat moet slechts een klein ogenblik in de ammoniakkamer zijn geweest. De plaat kleurt namelijk bijna onmiddellijk. Het is ook belangrijk dat de TLC platen niet tegen elkaar aan komen tijdens het uitvoeren van de proef.